快捷型植物基因組DNA提取試劑he 核酸提取
本試劑盒采用du特的緩沖液系統(tǒng)，特別適合從植物干粉或者新鮮植物材料中提取基因組 DNA。無需酚/氯仿抽提，使用安全方便，可最大限度去除雜質(zhì)蛋白及細(xì)胞中其他有機化合物。對樣品的起始重量沒有限制，實驗者可根據(jù)自己的需求靈活調(diào)整。提取的基因組 DNA 片段大，純度高，質(zhì)量穩(wěn)定可靠。快捷型植物基因組DNA提取試劑he 核酸提取
快捷型植物基因組DNA提取試劑he(溶液型)
快捷型植物基因組DNA提取試劑he 核酸提取
目錄號：40314
v 試劑盒組成、儲存、穩(wěn)定性：
試劑盒組成 | 保存 | 50次 (40314-50) | 100次 (40314-100) | 200次 (40314-200) |
緩沖液 AP1 | 室溫 | 25ml | 50ml | 100ml |
緩沖液 AP2 | 室溫 | 10ml | 20ml | 40ml |
DNA溶解液 | 室溫 | 10ml | 10ml | 20ml |
RNaseA(10mg/ml) | -20℃ | 250 μl | 500 μl | 1ml |
本試劑盒在室溫儲存 12 個月不影響使用效果。儲存事項:
1. 緩沖液 AP1、AP2 低溫時可能出現(xiàn)析出和沉淀，可以在 37℃-65℃水浴幾分鐘幫助重新溶解，不要劇烈搖晃，以免形成過量的泡沫?；謴?fù)澄清透明后冷卻到室溫即可使用。
2. 避免試劑長時間暴露于空氣中產(chǎn)生揮發(fā)、氧化、pH 值變化，各溶液使用后應(yīng)及時蓋緊蓋子。
v 產(chǎn)品介紹：
本試劑盒采用du特的緩沖液系統(tǒng)，特別適合從植物干粉或者新鮮植物材料中提取基因組 DNA。無需酚/氯仿抽提，使用安全方便，可最大限度去除雜質(zhì)蛋白及細(xì)胞中其他有機化合物。對樣品的起始重量沒有限制，實驗者可根據(jù)自己的需求靈活調(diào)整。提取的基因組 DNA 片段大，純度高，質(zhì)量穩(wěn)定可靠。使用本試劑盒回收的 DNA可適用于各種常規(guī)操作，包括酶切、PCR、文庫構(gòu)建、Southern 雜交等實驗。
v 產(chǎn)品特點：
1. 不需要使用有毒的苯fen、氯仿等試劑。
2. 快速，簡捷，操作整個過程可在1個小時內(nèi)完成。
3. 結(jié)果穩(wěn)定，產(chǎn)量高（比離心柱型的產(chǎn)量高一倍以上），OD260/OD280典型的比值達1.7～1.9，長度可達50Kb-150kb，可直接用于PCR，Southern-blot和各種酶切反應(yīng)以及文庫構(gòu)建。
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)
v 注意事項：
1. 所有的離心步驟均在室溫完成，使用轉(zhuǎn)速可以達到13,000 rpm的傳統(tǒng)臺式離心機，如Eppendorf 5415C 或者類似離心機。
2. 用戶需自備異丙醇、70％乙醇、液氮研缽、水浴箱。
3. 開始實驗前將需要的水浴先預(yù)熱好備用。
4. 本試劑盒為溶液型，可以很容易的按照比例擴大或者縮小每次處理的量，請聯(lián)系我們索取其它處理量的操作手冊。
v 操作步驟：（實驗前請先閱讀注意事項）
1. 取適量植物組織（新鮮組織100mg或干重組織20mg）在研缽中加入液氮充分碾磨成細(xì)粉。
2. 轉(zhuǎn)移細(xì)粉到一個1.5ml離心管，不要解凍，加入400μl緩沖液AP1和 4μl RNase A(10 mg/ml)，旋渦振蕩，充分混勻幫助裂解。
如果組織裂解困難，可根據(jù)需要加一個輕柔勻漿10秒的步驟幫助裂解。大多數(shù)情況下不需要離心去除未wan全裂解的組織，因為后面有一個離心去除的步驟。
3. 65℃水浴10分鐘，在水浴過程中顛倒離心管2-3次，混合樣品。
4. 加入130μl緩沖液 AP2，充分混勻，冰上放置5分鐘，14,000rpm離心5分鐘，小心吸取上清到一個新的1.5ml離心管，注意不要吸到界面物質(zhì)。
5. 可選步驟：將上清液再次14,000rpm(~13,400×g)離心5分鐘，小心緩慢吸取上清到一個新的1.5ml離心管中，不要吸到沉淀。
此步驟目的為去除上清液中的沉淀雜質(zhì)，使提取基因組DNA純度更高。
6. 加入0.7體積的室溫異丙醇（例如500μl的上清液加350μl異丙醇），顛倒30次混勻或者直到出現(xiàn)棉絮狀（絲狀）白色 DNA 沉淀。
7. 12,000rpm離心2分鐘，在管底可以見到白色的DNA沉淀塊，倒棄上清。
8. 加入1ml 70％乙醇，顛倒幾次漂洗DNA沉淀，12,000rpm離心1分鐘， 倒去上清（注意不要把DNA沉淀倒掉了），倒置后在吸水紙上輕敲幾下以控干殘留乙醇，還可以用槍頭小心吸掉管底沉淀周圍和管壁的殘留乙醇，空氣晾干沉淀幾分鐘。注意不要干燥過頭，否則DNA極其難溶；也不能殘留太多乙醇，否則乙醇可能抑制下游如酶切反應(yīng)。
9. 加入適量DNA溶解液重新水化溶解DNA沉淀，輕彈管壁混勻，可以放置在65℃溫育30-60分鐘（不要超過一小時），期間不時的輕彈管壁幫助重新水化 DNA。也可以在室溫或者 4℃放置過夜來重新水化 DNA。
10. DNA可以存放在 2-8℃，如果要長時間存放，可以放置在－20℃。
快捷型植物基因組DNA提取試劑he 核酸提取
